Anatomia Vegetal
Janise Knollman
As tcnicas usuais empregadas no processamento de materiais herborizados so limitantes porque no permitem reproduzir um laminrio permanente e porque o registro dos resultados temporrio. Em estudos de anatomia aplicada taxonomia, muitas vezes, necessrio utilizar exsicatas. Este trabalho teve como objetivo testar a utilizao de metacrilato (Historesin, Leica) na preparao e incluso de material herborizado, visando a obteno de laminrio permanente. Foram utilizadas folhas de plantas herborizadas do gnero Senecio Tourn. ex L. (Asteraceae), previamente reidratadas em H2O e armazenadas em etanol 70%. As amostras foram desidratadas em srie etanlica e submetidas (1v:1v) mistura de AE 95% e resina pura. Durante a infiltrao, com resina pura, o material foi submetido a vcuo durante 72 horas. Os blocos foram cortados em micrtomo de avano automtico, com navalhas de ao descartveis, e os cortes foram corados com azul-de-toluidina (pH 4,0). As lminas foram montadas em Permount. O laminrio permanente obtido apresentou qualidade superior dos produzidos pelas tcnicas usuais, pois foi possvel obter cortes seriados, com espessura determinada. Essa tcnica possibilitou otimizar a obteno de cortes, a partir de pequenos fragmentos de exsicatas.
The usual herbalized material processing techniques are limited due to the difficulties to produce permanent slide collections, and to register permanent results. In studies of taxonomy-applied anatomy, it is often necessary to use herbarium specimens. The objective of this study was to test methacrylate (Historesin, Leica) in the preparation and inclusion of herbalized materials to obtain a permanent slide collection. Herbalized leaves from the genus Senecio Tourn. ex L. (Asteraceae) were used, after being submitted to re-dehydration in ethanol 70%. The samples were dehydrated in an ethanol series and submitted to a mixture of AE 95% plus pure resin (1v:1v). The embbeding process in pure resin was submitted to a vaccum during 72 hours. The blocks were cut in an automatic progress microtome, using disposable steel razors and the cuts stained with Toluidine Blue pH 4.0. The slides were mounted in Permount. The permanent slide collection obtained showed high quality, compared with those obtained by the usual techniques, because the cuts were seriate; cut thickness could be determined allowing the use of few samples for the analysis of the material.
As tcnicas usuais empregadas no processamento de materiais herborizados so limitantes porque no permitem reproduzir um laminrio permanente e porque o registro dos resultados temporrio. Em estudos de anatomia aplicada taxonomia, muitas vezes, necessrio utilizar exsicatas. Este trabalho teve como objetivo testar a utilizao de metacrilato (Historesin, Leica) na preparao e incluso de material herborizado, visando a obteno de laminrio permanente. Foram utilizadas folhas de plantas herborizadas do gnero Senecio Tourn. ex L. (Asteraceae), previamente reidratadas em H2O e armazenadas em etanol 70%. As amostras foram desidratadas em srie etanlica e submetidas (1v:1v) mistura de AE 95% e resina pura. Durante a infiltrao, com resina pura, o material foi submetido a vcuo durante 72 horas. Os blocos foram cortados em micrtomo de avano automtico, com navalhas de ao descartveis, e os cortes foram corados com azul-de-toluidina (pH 4,0). As lminas foram montadas em Permount. O laminrio permanente obtido apresentou qualidade superior dos produzidos pelas tcnicas usuais, pois foi possvel obter cortes seriados, com espessura determinada. Essa tcnica possibilitou otimizar a obteno de cortes, a partir de pequenos fragmentos de exsicatas.
The usual herbalized material processing techniques are limited due to the difficulties to produce permanent slide collections, and to register permanent results. In studies of taxonomy-applied anatomy, it is often necessary to use herbarium specimens. The objective of this study was to test methacrylate (Historesin, Leica) in the preparation and inclusion of herbalized materials to obtain a permanent slide collection. Herbalized leaves from the genus Senecio Tourn. ex L. (Asteraceae) were used, after being submitted to re-dehydration in ethanol 70%. The samples were dehydrated in an ethanol series and submitted to a mixture of AE 95% plus pure resin (1v:1v). The embbeding process in pure resin was submitted to a vaccum during 72 hours. The blocks were cut in an automatic progress microtome, using disposable steel razors and the cuts stained with Toluidine Blue pH 4.0. The slides were mounted in Permount. The permanent slide collection obtained showed high quality, compared with those obtained by the usual techniques, because the cuts were seriate; cut thickness could be determined allowing the use of few samples for the analysis of the material.
A anlise anatmica de plantas herborizadas pode ser a nica fonte de material para estudos de anatomia aplicados taxonomia (Castro et al., 1997; Scatena et al., 1999; Teixeira et al., 2000). Entretanto, o material torna-se frgil por ter sido submetido a temperaturas elevadas para sua secagem. As tcnicas usuais para se trabalhar com materiais herborizados implicam reverso do processo de herborizao. Inicia-se pela reidratao por meio de fervura em gua destilada e posterior distenso com soluo de hidrxido de potssio (Smith & Smith, 1942). O material pode, ento, ser conservado em etanol 70%. Estas amostras so cortadas mo livre, para montagem de lminas provisrias. No recomendada a incluso em parafina para obteno de cortes em micrtomo e montagem de lminas permanentes, pois estas tcnicas implicam desidratao do material, o que provoca retrao das clulas e dos tecidos.
Assim, as tcnicas usuais de preparao de materiais herborizados impem limitaes, pois o tempo de durao do laminrio reduzido, no se pode garantir a espessura do corte, alm do fato de elas no permitirem a obteno de cortes seriados. Um outro aspecto a ser enfatizado a necessidade de cortar vrios fragmentos para obter um nmero reduzido de cortes de qualidade para anlise ao microscpio.
A poro mdia (nervura central e margem) foi isolada e desidratada na seqncia de etanol 85 e 95%, sendo mantida por 2 horas em cada. Posteriormente, as amostras foram submetidas mistura de etanol 95% e resina pura (Historesin Leica, preparada conforme instruo do fabricante), na proporo de 1v:1v, por 8 horas. A infiltrao foi feita com resina pura, em um dessecador submetido a vcuo, e em intervalos de 24 horas foram realizadas trs trocas de resina pura, totalizando 72 horas. A resina pura foi misturada ao polimerizador, conforme as instrues do fabricante, e as amostras emblocadas em moldes plsticos. Os blocos foram cortados em um micrtomo rotativo de avano automtico (RM 2155 - Leica), com navalhas de ao descartveis. Cortes de 10 m de espessura foram distendidos em banheira contendo gua destilada, aderidos em lminas histolgicas, mantidas em seqncia conhecida, e corados com azul-de-toluidina pH 4 (Vidal, 1977). As lminas foram secas em estufa a 34 C e montadas em resina sinttica Permount. No recomendada a utilizao de xilol nem a de lcool nesta etapa, pois estes compostos podem interferir na colorao e na aderncia dos cortes lmina.
Algumas amostras das mesmas pores foliares foram preparadas conforme a metodologia usual. Os cortes foram feitos mo livre e corados com safranina soluo aquosa e azul-de-astra (Gerlach, 1969). As lminas foram montadas em gelatina glicerinada e lutadas com esmalte.
A folha de Senecio emilioides (Figura 1a, b) hipoestomtica e recoberta por epiderme uniestratificada, o mesofilo dorsiventral e os feixes so vasculares colaterais. Ductos secretores esto presentes, associados ou prximos ao floema, tanto na nervura central quanto nas laterais.
Em Senecio leptoschizus (Figura 1c, d) as folhas so pinactisectas e na poro mediana verifica-se que os estmatos esto presentes em ambas as faces (folhas anfiestomticas) e que a epiderme, que uniestratificada, forma uma depresso na face adaxial, onde se localizam tricomas. O mesofilo dorsiventral e os feixes so colaterais. Ductos secretores esto presentes, associados ou prximos ao floema, nas nervuras.
Os cortes obtidos dos materiais includos em historesina (Figura 1a, c, e) so mais ntidos e possibilitam descries anatmicas mais seguras que as daqueles submetidos tcnica convencional (Figura 1b, d, f).
Entre as vantagens resultantes deste mtodo, destacam-se: a produo de laminrio permanente, que poder servir como testemunho do estudo; os cortes podem ser seriados; a espessura do corte determinada; e poucas amostras so suficientes para se proceder anlise e interpretao anatmica. A qualidade do laminrio obtido por essa tcnica superior, comparada daqueles obtidos pelas tcnicas usuais.
realizada uma reviso de literatura que procura aproximar a anatomia vegetal do contexto da produo vegetal. O principal objetivo o de contribuir para que o professor de Botnica possa proporcionar aos alunos dos cursos de Agronomia compreenso da diversidade da organizao estrutural do vegetal.
A literature revision is accomplished to approach the plant anatomy within the context of the plant production. The main objective is to contribute so that the Botany teacher will be able to make it provide for the students of the Agronomy courses to understand the diversity of behaviors in the structural organization of the plant.
A anatomia vegetal tem relevante destaque na Agronomia, principalmente na Fitotecnia, afinal o corpo do vegetal o seu principal recurso. As prticas agriculturveis exigem uma ateno especial na relao dos diferentes vegetais com os diversos manejos pois, o corpo do vegetal est dinamicamente relacionado com essas prticas.
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