Proteine - Test del Biureto.
Alfredo
viola.
C'è qualcuno che può spiegarmi a livello molecolare che cosa succede?
Che tipo di interazione si crea tra gli ioni Cu(II) contenuti nel biureto A
e il legame peptidico delle proteine tale da determinare la formazione di un
precipitato di colore viola? E perché questo tipo di reazione avviene solo
in ambiente basico e non in amb. neutro o acido?
Grazie a chi vorrà rispondermi.
Luke
fammelo sapere, ho come controllare) che due legami polipeptidici formino un
complesso tetracoordinante con lo ione rame. L'ambiente è basico per
prevenire la protonazione dell'azoto ammidico che potrebbe inficiare il test
a livello quantitativo.
"Alfredo" <AlfR...@tin.it> ha scritto nel messaggio
news:95hh41$nuj$1...@fe1.cs.interbusiness.it...
Alfredo
news:95ru1c$ggj$1...@pegasus.tiscalinet.it...
> Mi sembra di ricordare (se ti sono necessarie informazioni dettagliate
> fammelo sapere, ho come controllare) che due legami polipeptidici formino
un
> complesso tetracoordinante con lo ione rame.
Ho ben chiaro come procedere in laboratorio ma mi servirebbe una spiegazione
a livello molecolare molto rigorosa, se potessi inviarmi le informazioni
dettagliate (anche in e-mail) te ne sarei molto grato.
Ti ringrazio molto per la disponibilità.
Alfredo.
Luke
(ovviamente sono quattro, nel precedente post ho scritto due per errore). La
soluzione è costituita da solfato di rame e potassio tartarato di sodio
(tamponante?!?). Il massimo di assorbimento del complesso è a 540-560 nm. La
sensibilità del metodo è di circa 1mgr/ml (bassina, in effetti non l'ho mai
visto usare, il Biorad è moooolto più sensibile). Il metodo ha però il
pregio di essere riproducibile e probabilmente anche poco costoso.
Se hai ulteriori dubbi....
"Alfredo" <koss133TOGL...@hotmail.com> ha scritto nel messaggio
news:95ueq0$hvf$1...@fe1.cs.interbusiness.it...
Piergiorgio Pazzi
al pH a cui si effettua il test il Cu(II) precipeterebbe come ossido bruno.news:95v5s1$lsr$1...@pegasus.tiscalinet.it...
p. bianchi
> (tamponante?!?).
No, serve a evitare la torbidita'.
> sensibilità del metodo è di circa 1mgr/ml (bassina, in effetti non l'ho mai
> visto usare, il Biorad è moooolto più sensibile). Il metodo ha però il
> pregio di essere riproducibile e probabilmente anche poco costoso.
Il biureto e' il metodo d'elezione per le proteine totali nel siero.
"Biorad" non e' un nome di metodo ma di produttore (Al blu di Coomassie?
rosso ponceau + TCA? pirogallolo? oro colloidale?).
> Se hai ulteriori dubbi....
L'amico diceva che la metodica l'aveva perfettamente chiara, domandava
dettagli molecolari. Io sono un empirico e non li ho sottomano.