Fontes de erro em medidas de Fluorescência

[Markos]

Oi Juliano,

Achei ótimo o seu comentário sobre os cuidados que se deve ter com os fenômenos de espalhamento (scattering) nas medidas de Fluorescência.

Procurei algumas informações para aprender um pouco mais sobre Fluorescência.

Como mostra o diagrama da figura:

https://www.edinst.com/wp-content/uploads/2018/09/Figure-1-1-e1536922354584.png

A luz de excitação pode sofrer 4 processos:

1 - transmissão direta sem interação com a amostra

2 - espalhamento Rayleigh (também chamado Mie ou espalhamento geométrico dependendo do comprimento de onda de excitação e do tamanho das partículas responsáveis pelo espalhamento. Muito importante nas medidas de Turbidez)

3 - espalhamento Raman, que pode ser do tipo Stokes (em maior comprimento de onda) ou anti-Stokes (em menor comprimento de onda)

4 - emissão de Fluorescência

Fonte: https://www.edinst.com/blog/raman-scattering-blog/

Mas além desses processos a luz que chega no detector pode também ser originada do fenômeno de "difração de segunda ordem" nos monocromadores (de excitação e emissão). Como mostra a figura: https://www.edinst.com/wp-content/uploads/2018/11/Figure-1-1-1024x775.png

Uma explicação mais detalhada está disponível no link:

https://www.edinst.com/blog/second-order-diffraction/

Fiquei pensando até que ponto essas fontes de erros podem ser um problema quando se usam LEDs como fontes de excitação e como detectores.

Os LEDs costumam apresentar uma banda de emissão praticamente "monocromática". E por isso vamos minimizar os problemas de "luz espúria" (stray light), pois não vamos precisar de filtros de emissão, e consequentemente evitamos o fenômeno de "difração de segunda ordem".

E quando usado como detectores apresentam uma boa "seletividade espectral" e portanto também não vamos precisar de filtros para selecionar a luz de emissão, e consequentemente também evitamos o fenômeno da "difração de segunda ordem".

A figura http://www.c2o.pro.br/hackaguas/ar01s21.html#LEDs_emissao_e_sensibilidade_00 mostra como fazer o "casamento" dos LEDs para uso como fonte e detector.

Fazendo essas considerações, imagino que o "espalhamento Raman" pode ser um efeito interferente significativo. E nesse caso podemos usar as leituras do branco (solvente puro) para subtrair das leituras da amostra e tentar minimizar a interferência do efeito Raman.

O que você acha?

Qual a sua opinião?

Um Abraço,
Markos

-------- Mensagem encaminhada --------

Assunto:	errata
Data:	Tue, 21 Sep 2021 20:35:34 -0300
De:	Juliano <juliano.p...@gmail.com>
Para:	Markos <mar...@c2o.pro.br>

quando eu falei o efeito de dispersão em solução eu me referia a isso

um grande abraço!

--

Juliano Passaretti Filho

[Juliano]

Sim você está correto, aproveito para avisar que já vi o artigo da cela de multifotometro. 

Acho que é um caminho um caminho viável. Minha preocupação maior é caso a água fique muito turva aumentando o efeito rayling de espalhamento (Strokes TB entra na conta). Se a gente pudesse usar um laser monocromático seria bem mais fácil. 

Como combinamos vou tentar montar esses modelos de cela para testarmos. Acho que sua idéia pode ser um ponto de partida muito interessante. 

Espero que fique bom e nos ajude nessa etapa crítica de trabalho.

Um grande abraço e desculpe a demora em responder, precisei viajar para trabalhar.

--
Site com temas de interesse do grupo:
 
www.c2o.pro.br/hackaguas/index.html
 
As mensagens do grupo estão disponíveis na página:
 
https://groups.google.com/forum/#!forum/hackagua
---
Você recebeu essa mensagem porque está inscrito no grupo "Hackagua" dos Grupos do Google.
Para cancelar inscrição nesse grupo e parar de receber e-mails dele, envie um e-mail para hackagua+u...@googlegroups.com.
Para ver essa discussão na Web, acesse https://groups.google.com/d/msgid/hackagua/395957a6-6769-9b8a-84bb-7faf59f095e6%40c2o.pro.br.

[Markos]

Fala Juliano,

Uma das vantagens de um sistema OnLine é poder fazer diluições da amostra automatizadas.

E dessa forma seria possível implementar no software de controle um faixa de leitura aceitável.

Caso a amostra tenha uma leitura acima do limite máximo, o próprio programa poderia retomar a amostragem fazendo diluições crescentes, até que as leituras fiquem na faixa aceitável.

E com respeito ao laser, você já teve experiência em montar algum dispositivo usando um laser?

É possível comprar um laser com fornecedores nacionais ou só importando?

Um Abraço,
Markos

Para ver essa discussão na Web, acesse https://groups.google.com/d/msgid/hackagua/CAOGW-1wU%2BaeTjkxABJv9t9JJGoZ%3DFMLXFdfpsOs0%3DvcY6T3PWA%40mail.gmail.com.