Chromatographie vs. Elektrophorese
Stefan Fischer Rivera
vor kurzem bin ich mit HPLC (High Performance (Preasure) Liquide
Chromatography) konfrontiert worden.
Da ich damit zunächst nichts anfangen konnte, habe ich einige
Informationen dazu gesucht und gefunden.
Nun stellt sich für mich als nicht Chemiker, Biologe, was denn der
Unterschied zwischen HPLC und einer
Elektrophorese ist, bzw. warum in HPLC der Begriff Chromatographie
auftaucht?
Nach meinem Verständniss handelt es sich doch bei HPLC um ein
Trennverfahren, mit dem ich Moleküle unterschiedlicher Größe, Polarität,
etc. trennen kann, genau wie es bei einer (Elektro-)Phorese geschieht.
Chromatographie hat für mich eher was mit Lichtspektren zu tun.
Vielleicht kann jemand diesen (vermeindlichen) Wiederspruch für mich
auflösen.
Ciao,
Stefan
--
++ The first word of the first line - The card's not there ++
+ Stefan Fischer Rivera mailto:sfri...@gmx.de ++
Franz S. Borgerding
>
Hallo Stefan,
> vor kurzem bin ich mit HPLC (High Performance (Preasure) Liquide
> Chromatography) konfrontiert worden.
böse Zungen sagen auch, das hieße "high price"...
> Nun stellt sich für mich als nicht Chemiker, Biologe, was denn der
> Unterschied zwischen HPLC und einer
> Elektrophorese ist, bzw. warum in HPLC der Begriff Chromatographie
> auftaucht?
>
> Nach meinem Verständniss handelt es sich doch bei HPLC um ein
> Trennverfahren, mit dem ich Moleküle unterschiedlicher Größe, Polarität,
> etc. trennen kann, genau wie es bei einer (Elektro-)Phorese geschieht.
> Chromatographie hat für mich eher was mit Lichtspektren zu tun.
Ursprünglich hatte Chromatographie tatsächlich mal etwas mit Farben zu
tun. Das sind die Rungeschen Tintenbilder aus dem letzten Jahrhundert.
(http://home.t-online.de/home/hh.bussemas/index.htm)
Der Begriff hat sich gehalten, auch wenn man heute unter Chromatographie
allgemein ein Trennverfahren versteht, das aus einer stationären Phase
und einer mobilen Phase zusammengesetzt wird.
Dabei hast Du (egal ob bei Dünnschicht-, Papier-, Gas- oder sonstwas für
einer Chromatographiemethode) eine stationäre Phase, bei einem
Gaschromatograph z.B. die Gelbeschichtung innerhalb der Säule und
transportierst jetzt mittels der mobilen Phase (einem Trägergas, beim GC
meist H_2 oder He) Deine Probe durch die Säule.
Dabei wird Deine Probe abhängig von Polarität etc. durch unterschiedlich
starke Wechselwirkungen mit der stationären Phase getrennt und kommt am
anderen Ende der Säule hübsch fraktioniert heraus. Bei der HPLC geht das
genauso, nur wird hier eine flüssige mobile Phase verwendet.
Der Unterschied zur Elektrophorese ist am einfachsten folgender: Bei der
Chromatographie hast Du einen *Volumenstrom* durch das Gerät, bei der
Elektrophorese bewegt sich Dein Lösungsmittel nicht, lediglich die zu
trennenden Moleküle werden durch unterschiedlich starke Wechselwirkungen
mit dem elektrischen Feld bewegt.
Außerdem ist für die Trennung in der Chromatographie die Wechselwirkung
zwischen stationärer Phase und Probe entscheidend, während in der
Elektrophorese die Wechselwirkung zwischen elektr. Feld und Probe
entscheidend ist.
Langt das?
Gruß,
Franz
--
Dipl.-Chem. Franz S. Borgerding | Glück heißt Wasser bei 4°C.
Forschungszentrum Karlsruhe GmbH | (Ken-Dominic Flechtner)
franz.bo...@itc-cpv.fzk.de |
Stefan Fischer Rivera
>
> > vor kurzem bin ich mit HPLC (High Performance (Preasure) Liquide
> > Chromatography) konfrontiert worden.
>
> böse Zungen sagen auch, das hieße "high price"...
kann ich verstehen :)
> Ursprünglich hatte Chromatographie tatsächlich mal etwas mit Farben zu
> tun. Das sind die Rungeschen Tintenbilder aus dem letzten Jahrhundert.
Hoppla, offensichtlich habe ich Chromatographie mit Spektroskopie
vermauschelt!
> Der Begriff hat sich gehalten, auch wenn man heute unter Chromatographie
> allgemein ein Trennverfahren versteht, das aus einer stationären Phase
> und einer mobilen Phase zusammengesetzt wird.
Dann handelt sich also um eine nostalgische Note im heutigen
Sprachgebrauch. Sowas hatte ich schon fast vermutet.
> Der Unterschied zur Elektrophorese ist am einfachsten folgender: Bei der
> Chromatographie hast Du einen *Volumenstrom* durch das Gerät, bei der
> Elektrophorese bewegt sich Dein Lösungsmittel nicht, lediglich die zu
> trennenden Moleküle werden durch unterschiedlich starke Wechselwirkungen
> mit dem elektrischen Feld bewegt.
> Außerdem ist für die Trennung in der Chromatographie die Wechselwirkung
> zwischen stationärer Phase und Probe entscheidend, während in der
> Elektrophorese die Wechselwirkung zwischen elektr. Feld und Probe
> entscheidend ist.
>
> Langt das?
Jo, das langt. Vor allem die letzten beiden Absätze klären genau meine
Frage.
Besten Dank,
Joerg Geiger
> Stefan Fischer Rivera wrote:
>> vor kurzem bin ich mit HPLC (High Performance (Preasure) Liquide
>> Chromatography) konfrontiert worden.
> böse Zungen sagen auch, das hieße "high price"...
Nein, high pressure ist schon richtig. Der Druck auf den Analytiker
ist gemeint.
--
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* J"org Geiger - Institut f"ur Klinische Biochemie und Pathobiochemie *
* Universit"at W"urzburg *
* gei...@klin-biochem.uni-wuerzburg.de *
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